Amostragem das plantas

Connect.Gene

Colheita do material vegetal para análise genética

Para cada colheita foi feita uma folha de campo, com o intuito de recolher toda a informação de campo possível. Foi recolhida a seguinte informação: geomorfologia local (ex. encosta, caldeira, planalto, ribeira, etc), material geológico (cone de escórias, basáltico, material de projeção, etc), substrato (ex: saxícola, humícola, turfícola, etc), declive, exposição (N, S, E, W), luminosidade (ex: Esciófito), linha de água (perto, longe), tipo de população (pequena, média , grande), número de indivíduos, altura máxima do indivíduo, distribuição de habitats (mosaicos esparsos, indivíduos esparsos), % demográfica (jovens, adultos) e fenologia à colheita). No caso do corrente projeto esta foi a informação necessária, no entanto esta deverá ser adaptada consoante os objetivos de projetos futuros. Abaixo mostramos um exemplo de plano de amostragem, no caso do Trichomanes speciosum:

Material colhido

Depois das populações a integrar neste projeto terem sido escolhidas, a decisão do número de amostras a colher por população foi tomada. O número alvo de 10 indivíduos por população foi estabelecido como valor base. Contudo, o valor real colhido foi dependente do tamanho da população em causa, mas sempre tentando manter uma boa relação proporcional entre o tamanho amostral e o tamanho da população.

Para todas as espécies englobadas neste projeto, com exceção do Isoetes azorica, foram colhidas folhas, o mais jovem possível, uma vez que quanto mais cutinizadas as folhas mais difícil será a extração de ADN, e maior probabilidade de contaminantes passarem para o produto final condicionando os procedimentos seguintes a nível de genética molecular.

Para o Isoetes azorica, devido à sua condição de planta aquática, a colheita foi feita e o material selecionado foi toda a planta, mantendo sempre em atenção que o material selecionado pertencia ao mesmo indivíduo.

Conservação do material

Após colheita todo o material foi mantido refrigerado até ser pesado (entre 100-150 mg de material verde) e depois ultracongelado a -80ºC até futura utilização.